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细胞凋亡

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光

产品编号:E0109       CAS#:       Ex (nm):498 Em(nm):            分子式: 分子量:E0109        溶剂:        包装:200 Tests 供货状态:3-5天        储存条件:低温避光-20 零售价格: 2544.00

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产品描述

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒是通过测量Caspase 8的活性而用于细胞凋亡检测的。Caspase 8 是一种Caspase蛋白,CASP8基因所编码。在神经元变性疾病中,例如亨廷顿综合症,caspase 8扮演着重要角色。Caspase 8已被证明具有底物选择性,其肽基序为Ile-Glu-Thr-Asp (IETD)。该试剂盒使用(Ac-IETD)2-R110作为荧光指示器来检测caspas-8的活性。通过caspas-8的切割R110肽产生强绿色荧光,其发射光在520 nm和530 nm之间,激发光为480 nm和500 nm之间。这种特性使得试剂盒能适合于FITC滤光器。本试剂盒提供所有必需组分和最佳操作流程。该实验结果稳定,快速且适应高通量筛选。它不仅能够定量凋亡细胞中caspas-8的活性还能筛选caspas-8的抑制剂。

 

产品编号

产品名称

规格

价格

E0109

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光

200Tests

2544RMB

工作溶液配制

将50μLCaspase8底物(组分A)加入10mL测定缓冲液(组分B)中并充分混合以制备Caspase 8工作溶液。 避光。 注意:Caspasae 8工作液不稳定,请及时使用。

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物(96孔板)或5μL/孔的5X测试化合物(384孔板)加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在5%CO 2,37℃培养箱中孵育所需的一段时间(对于用喜树碱或星形孢菌素处理的Jurkat细胞,4-6小时)以诱导细胞凋亡。

3.加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的Caspase 8工作溶液。

4.将板在室温下孵育30分钟至1小时,避光。注意:如果需要,在室温下加入Caspase 8工作溶液10分钟前,向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-IETD-CHO caspase 8抑制剂,以确认对caspase 8样活性的抑制作用。

5.以800rpm离心细胞板(特别是对于非贴壁细胞)2分钟(制动关闭)。

6.用荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm(截止= 515nm)下监测荧光增加。

 


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