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酶分析

Amplite 荧光法D-乳酸检测试剂盒

产品编号:G0402       CAS#:       Ex (nm):571 Em(nm):            分子式: 分子量:G0402        溶剂:        包装:200 Tests 供货状态:3-5天        储存条件:低温避光-20 零售价格: 3840.00

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产品描述

乳酸是手性的并且具有两种光学异构体:L-乳酸和D-乳酸。 在代谢和运动过程中,乳酸盐通过乳酸脱氢酶(LDH)不断从丙酮酸产生。 监测乳酸水平是评估组织需氧量和利用率之间平衡的好方法,在研究细胞和动物生理学时非常有用。 D-乳酸不被哺乳动物代谢,其从体内消除主要取决于肾脏排泄。 D-和L-乳酸存在于许多发酵乳制品中,例如酸奶和奶酪,以及腌制蔬菜,腌制肉类和鱼类。 D-和L-乳酸含量是食品的质量指标,如鸡蛋,牛奶,果汁和葡萄酒。 血液中异常高浓度的D-乳酸通常是胃肠道中细菌过度生长的反映。

Amplite 荧光法D-乳酸检测试剂盒用于检测L-乳酸盐或D-乳酸盐。 生物样品,如血清,血浆,尿液,以及细胞培养样品。 在酶偶联测定中,乳酸与NADH成比例相关,其通过荧光NADH传感器特异性监测。 可以通过荧光酶标仪在Ex / Em = 540nm / 590nm下读取信号。 使用这种Fluorimetric Amplite D-Lactate Assay Kit,我们能够在100μL反应体积中检测到少至1.4μM的D-乳酸。 它应用广泛,可以很容易地适用于需要测量D-乳酸的各种应用。

 

产品编号

产品名称

规格

价格

G0402

Amplite 荧光法D-乳酸

检测试剂盒

200 Tests

3840RMB

操作方法

1.准备NAD储备溶液(100X):

向NAD小瓶(组分C)中加入100μLH2O,制成100X NAD储备溶液。

2.准备D-乳酸储备液:

将200μLH2 O或1×PBS缓冲液加入到D-乳酸盐标准品(组分D)的小瓶中以制备100mM D-乳酸盐标准溶液。

注意:未使用的D-lacate标准储备溶液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

3.准备D-乳酸标准品(0至1 mM)的连续稀释液:

3.1将10μLD-乳酸储备溶液(来自步骤2)加入990L 1x PBS缓冲液中以产生1mM D-乳酸盐标准溶液。

注意:稀释的D-乳酸标准溶液不稳定,应在4小时内使用。

3.2取200μL的1mM D-乳酸标准溶液进行1:3连续稀释,得到300,100,30,10,3,1和0μM的D-乳酸标准品系列稀释液。

3.3如说明书中的表1和2中所述,将含有D-乳酸盐标准品和含D-乳酸盐的测试样品的系列稀释液加入到固体黑色96孔微量培养板中。

4.准备D-乳酸测定混合物:

4.1将5 mL测定缓冲液(组分B)加入一瓶酶混合物(组分A)中。

4.2将50μLNAD储备液(100X,来自步骤1)加入组分A(来自步骤4.1)的瓶中,并且要混合均匀。

注意:这种D-乳酸测定混合物足以用于一个96孔板。未使用的D-乳酸测定混合物应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

5.运行D-乳酸测定:

5.1将50μLD-乳酸测定混合物(来自步骤4.2)添加到D-乳酸标准品,空白对照和测试样品(参见步骤3.3)的每个孔中,以使总D-乳酸测定体积为100μL/孔。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μLD-乳酸测定混合物。

5.2在室温下孵育反应30分钟至2小时,避光。

5.3用Ex / Em = 530-570 / 590-600nm的荧光板读数器监测荧光增加(最佳Ex / Em = 540 / 590nm,在570nm处截止)



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