Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 红色荧光,适合微孔板检测

Cell Meter磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 *红色荧光,适合微孔板检测*是通过检测PS的翻转来测定细胞凋亡。在凋亡细胞中，PS从胞内移位到胞外表面，因此PS出现在细胞的外表面可以作为细胞凋亡的起始或者中间阶段的通用指示器，也可以通过其形态学改变来测定。该试剂盒使用我们独有的红色荧光Apopxin PS传感器特异性的结合PS，其亲和性高于Annexin V(Kd<10nM)。该试剂盒使用的PS传感器结合膜上的PS后，发出红色的荧光。因为与PS的高亲和性，该试剂盒比其它基于Annexin-V，仅能用荧光显微镜和流式检测凋亡的试剂盒更稳定，并且本试剂盒除上述两种仪器外还能使用荧光酶标仪。

溶液配制

工作溶液配制

将10 µL Apopxin™Red（组分A）加入1 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成Apopxin™Red工作溶液。

操作步骤

1.通过向PBS或所需的缓冲液中加入10X /孔（96孔板）或2.5 µL /孔（384孔板）的10X测试化合物储备溶液来处理细胞。 对于空白孔（不含细胞的培养基），添加相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在5％CO2、37°C的培养箱中孵育所需的时间（对于喜树碱处理过的Jurkat细胞，需要4-6小时）以诱导凋亡。

3.在每个孔中加入100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的Apopxin™Red工作溶液。

4.在避光条件下，于室温下孵育细胞板至少1小时。

5.以800 rpm的速度离心细胞板（特别是非粘附细胞）2分钟（制动）。

6.使用荧光酶标仪（Ext / Em = 590/630 nm（截止= 610 nm））或使用带有TexasRed®滤光片的荧光显微镜对图像池进行荧光强度监测。